百奥赛图提供了全面的体外细胞和生化分析服务。体外细胞测定实验包括原代细胞测定和传代细胞测定。原代细胞检测包括激动剂介导的T细胞活化、混合淋巴细胞反应(MLR)、抗原回收、T细胞和NK细胞毒性、DC细胞活化、巨噬细胞吞噬、抗体依赖性细胞毒性(ADCC)、补体依赖性细胞毒性(CDC)和抗体结合实验等常用检测方法有细胞因子释放定量检测基于流式细胞术(FACS)的细胞标记物检测。传代细胞检测实验包括细胞表面marker或靶标的表达,抗体等结合,细胞增殖和细胞死亡的多种统计,以及利用荧光和生物发光、光学进行的报告系统基因检测。百奥赛图也利用表面等离子体共振(SPR)进行生化结合测定和亲和测定。

我们的服务

  • 药物的细胞结合测定

  • 药物与人源化小鼠脾细胞的结合测定 

  • 药物阻断试验 

  • 体外刺激测试

  • 基于MLR的体外刺激测试

  • 体外细胞毒性试验(ADCC,CDC)

  • 溶血/凝血试验

细胞表面抗原结合试验:测定MC38-hPD-L1细胞表面的hPD-L1


Cell-Surface-Antigen-Binding

MC38是一种小鼠结肠癌细胞系。MC38- hPD-L1是将MC38细胞进行改造,表达hPD-L1替代mPD-L1。通过流式细胞术利用抗鼠和抗人PD-L1抗体检测PD-L1表达,分析结果表明,PD-L1只在MC38- hPD-L1中表达,而小鼠PD-L1只在野生型MC38中表达。



案例2:抗体依赖性细胞毒性(ADCC)测定

抗体依赖性细胞


特异性细胞毒性

图1.抗人CTLA4抗体的ADCC

本实验以人PBMCs作为效应细胞。以高浓度CFSE标记的Jurkat- hCTLA4细胞为靶细胞,以低浓度CFSE标记的Jurkat WT细胞为对照细胞。效应细胞、靶细胞和对照细胞在不同浓度的抗人CTLA-4抗体存在下孵育18h。

特异性细胞毒性=[1-(对照孔比率/实验孔比率)] * 100%;比率=(CFSElow细胞数/ CFSEhigh细胞数)

案例3:补体依赖性细胞毒性(CDC)实验

利妥昔单抗介导的CDC实验。 在含有补体的培养基下,将Raji细胞与不同浓度的利妥昔单抗混合,并孵育2h。 释放到培养基中的LDH作为检测细胞毒性的指标。 利妥昔单抗对Raji细胞表现出较强的CDC活性。

细胞毒性%=(实验孔LDH检测值-自发释放孔LDH检测值)/(细胞最大LDH释放)* 100%


案例4:T细胞活化试验

T细胞活化试验

将人PBMC(1×105)添加到含有SEB(10 ng / mL)和不同量Ipilimumab或同型对照抗体的96孔培养板中,孵育48h, 通过ELISA方法检测IL-2的释放。 结果表明,ipilimumab剂量依赖性地增强SEB刺激PBMC产生IL-2。



案例5:混合淋巴细胞反应(MLR)测定

混合淋巴细胞反应

将人T细胞和异体树突细胞以5:1的比例于96孔圆底培养板中混合,加入不同浓度的nivolumab或同型对照抗体,孵育72小时后ELISA测定释放IFN-γ含量。结果表明,nivolumab在混合淋巴细胞反应(MLR)中剂量依赖性地增强了IFN-γ的产生。


案例6:红细胞沉降试验

Sediment-Test.png

将2%的红细胞(RBC)从0 ng/mL到10 ng/mL不等浓度的抗人CD47抗体孵育0.5h后检测红细胞沉降没有毒性或病理反应,红细胞通常会沉降到底部。如图所示,与毒性较低的抗CD47抗体(底部)相比,毒性较的抗CD47抗体(顶部)较低的浓度(红色条形图)阻止了红细胞沉降


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